ESAT-6 y CFP-10 mejoran el diagnostico in vivo de la Tuberculosis bovina

  • Susana Flores Villalva
  • Jessica Saldaña Zepeda
  • José Ángel Gutiérrez Pabello

Resumen

El diagnóstico de la tuberculosis bovina requiere se desarrollen técnicas con mayor especificidad y sensibilidad y que a la vez permitan diferenciar individuos infectados con M. bovis de los vacunados con BCG (diagnóstico DIVA) para permitir el uso de la inmunización en los programas de erradicación y control de esta enfermedad. En la última década se han identificado algunas proteínas como ESAT-6 y CFP-10 que están codificadas en regiones génicas de Mycobacterium bovis pero están ausentes en BCG. Debido a la relevancia de estos antígenos, existe la necesidad de su producción en grandes cantidades para su evaluación in vivo e in vitro. En este trabajo reportamos la producción in vitro de estas proteínas y su uso intradérmico. Los genes esat-6 y cfp-10 fueron amplificados por PCR a partir de ADN genómico de M. bovis AN5. Los amplicones se clonaron en los vectores pBAD202/D-TOPO® y pET102/D-TOPO®, respectivamente, mientras que la expresión de las proteínas se llevo a cabo en las cepas de E. coli TOP10 y BL21. El rendimiento de ESAT-6 fue de 1,692 μg/L (fracción soluble) y 6,590 μg/L (fracción insoluble); en el caso de CFP-10, se obtuvo 2,093 μg/L. Con el objetivo de evaluar su desempeño in vivo,
realizamos un estudio en animales infectados con Mycobacterium bovis de forma natural. Nuestros resultados pudieron demostrar que es posible identificar animales infectados con el uso de 20μg totales de estas proteínas. Además, el coctel proteico no indujo respuestas en animales sanos, demostrando así una alta especificidad.

Publicado
2020-04-09
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FLORES VILLALVA, Susana; SALDAÑA ZEPEDA, Jessica; GUTIÉRREZ PABELLO, José Ángel. ESAT-6 y CFP-10 mejoran el diagnostico in vivo de la Tuberculosis bovina. Revista Ecuatoriana de Ciencia Animal, [S.l.], v. 3, n. 3, p. 63-73, abr. 2020. ISSN 2602-8220. Disponible en: <http://revistaecuatorianadecienciaanimal.com/index.php/RECA/article/view/183>. Fecha de acceso: 11 jul. 2020